經過對人工栽培試驗的分析,還發現﹕1.低聚糖要比多糖(淀粉)類更有利于繁殖,可用它作為培養基中的碳源﹔2.低濃度的單糖有利于菌絲的分化和子實体的生長﹔3.天門冬 胺是最适于繁殖生長的氮源﹔4.維生素B1可以加速菌絲對碳源的利用、有利于菌絲的分化﹔5.各种可以引起菌絲自溶的因素,能使菌絲中的某些誘導或促進繁殖生長的因子釋放出來,有利于菌絲的分化﹔6.當基質中木質素 活性最高時,出現子實体原基。
三、影響靈芝生長和繁殖的理化因素
靈芝菌絲体及子實体生長期的生理活動除与營養條件有關之外,還受各种理化因素的影響,如溫度、水分、空气、光線、酸鹼度等。
(一)溫度
靈芝的菌絲可在5∼35℃的范圍內生長,超出這個溫度范圍,菌絲則停止生長或出現异常生長及死亡。
暴露在空气中的菌絲可耐受0℃的低溫,此時雖不能繼續生長,但可以保持生理上的最低活動,待溫度升高到适宜的條件時又能正常生長。生長在朽木中的菌絲或其它基質中的菌絲都可以安全的度過-20∼-40℃的嚴冬季節。但是當遇到高低溫度變化劇烈時凍時融的0℃上下的變化時,則會導致菌絲因失水而死亡。
在35℃以上的高溫時,菌絲的呼吸作用大于同化作用,体內營養的消耗大于合成,造成代謝活動异常,也會導致死亡。特別是在高溫高濕的條件下,更易引起死亡。
靈芝菌絲在基質中最适宜生長的溫度是在(25±2)℃的范圍。
靈芝的子實体生長期對溫度的适應范圍為5∼30℃之間,對高溫的适應能力減弱。子實体分化及生長的較适溫度是7∼25℃左右,最适宜的溫度為18∼20℃。
在繁殖生長期間如有8∼10℃的溫差變化,則更有益于分化及生長。
在溫度偏低的條件下,子實体的質地較好些,如菌肉致密,皮殼色澤深,光澤好﹔反之雖然生長快些,但質量稍差。
(二)水分
1.對基質中含水量的要求﹕在基質中的含水量為30%∼80%的范圍內菌絲可以生長,最适宜的含水量為60%∼70%。如基質中含水量低于30%,菌絲則處于休眠狀態,停止生長或分化。如含水量高于80%時,由于基質中氧气含量過低,也會導致菌絲休眠,或者腐爛。
2.對空气中相對濕度的要求﹕
菌絲生長時所需要的水分皆來自基質,故只要空气中相對濕度維持在70%左右,能保証基質中水分不因空气干燥而蒸發即可。
如相對濕度低于70%,在自然條件下則可影響菌絲的生長速度,則需向基質及空气中補充水分。如高于80%,則要求通風,降低空气濕度,以保証基質中有足夠的氧气。
子實体生長期間,要求空气中的相對濕度保持在85%∼90%之間。如相對濕度低于60%,由于基質水分及菌絲水分不足,菌絲缺水,向子實体內運送營養減少,子實体內水分蒸發,則可造成子實体生長停滯。長期的干燥條件,才會引起子實体干縮,不再生長。
相對濕度低于45%時,菌絲生長停止,不再發生分化。如已形成幼小的子實体,也會在這种條件下干死。
當相對濕度高于95%時,由于空气中氧气的含量降低,呼吸作用受阻,導致菌絲及子實体的窒息,引起菌絲自溶和子實体的腐爛、死亡。
(三)氧与二氧化碳
1.二氧化碳對生長与發育的影響
在自然條件下,空气中二氧化碳的濃度為 0.03%,此時菌絲可正常生長。如二氧化碳的濃度稍增加,則可促進菌絲的生長。實驗証明﹕如溫度條件不變,當二氧化碳的濃度增加到0.1%∼10%時,菌絲生長速度可加快2∼3倍以上。
當菌絲由營養生長轉向繁殖生長時,如二氧化碳的濃度為0.034%時,如加速分化,但高于0.1%時,則抑制分化。在溫度較高、濕度較大的條件下,二氧化碳濃度偏高會抑制菌絲生長,甚至會導致腐爛。
子實体生長期內,所需二氧化碳濃度不超過0.03%為好,濃度高于0.1%時,雖可促進菌柄的生長,但不能形成菌蓋,只能形成鹿角狀多分枝的畸型子實体果。
2.氧對生長与繁殖的影響
靈芝必須在有氧气存在的環境中生長。空气中含氧量正常(21%)時,菌絲或子實体均可正常生長。當環境中氧含量低于21%時,對菌絲的生長及分化也有益。如氧含量低于20%,就等于二氧化碳濃度增加到1%以上,會直接影響到子實体的發育,導致菌柄細長多分枝,而無菌蓋。
當氧含量高于21%時,菌絲的生長將受抑制,但一般情況下不會引起死亡。
(四)酸鹼度
靈芝的菌絲可以在pH3∼9的范圍內生長。最适于菌絲生長的pH 值為4∼6,最佳pH 為5∼5.5。
當pH8時, 菌絲生長速度減慢。pH大于9時,菌絲將停止生長,因為在鹼性條件下,鈣、鎂等無机离子的溶解度增大,會抑制各种 的活性、維生素的合成和正常的代謝活動。
在菌絲生長過程中不斷有中間代謝產物產生,其中包括各种有机酸,基質中的酸性就會相應的增加,同時 的活性也有所增強。
在菌絲的中間代謝產物當中,也有氨的產生和積累,并因此使基質向鹼性條件變化。
此外,基質中某些种陰性离子被菌絲吸收后,也會使基質向鹼性變化。總之,菌絲的正常代謝活動對基質中pH值具有一定的自身調節能力。
子實体生長期,需要有中性或弱鹼性條件。酸性條件下擔孢子的發育受到阻礙。
(五)光照
靈芝是异養性植物,不能進行光合作用。靈芝的菌絲体可以在完全黑暗的條件下正常生長。
凡是光波在400∼800nm范圍內的可見光或藍紫光對菌絲生長均有明顯的抑制作用。特別是260∼265nm的紫外光能夠破坏菌絲中的核蛋白質。如經這种紫外光照射30min,則可殺死菌絲。直射的太陽光,對菌絲有害,光線越強對菌絲的影響越大。
570∼920nm的紅光,對菌絲的生長無害。
菌絲的分化需要400∼500nm的藍光誘導。
在黑暗或弱光(照度數20∼1000lx)的條件下,只長菌柄,不形成菌蓋。
當光照強度達到1500lx以上時,菌蕾生長速度快、能形成正常的菌蓋。由于菌柄具有一定的趨光性,所以單方向的光也能促使菌柄過長且彎曲。
靈芝子實体內對光的感受器主要是与維生素B2(核黃素)及類胡蘿卜素有關。因而,子實体內這些感光物質偏多或偏少,均會使之畸型發育。
擔子的生長是畏光的,特別是紫光及紫外光對其生長有害。但是生殖菌絲分化出擔子時,需要有紫光的誘導。
藍光和紫光對擔孢子的發育也是有害的。
(六)化學物質
用于防治植物病害的多种農藥對靈芝具有殺傷作用。如升汞、賽力散(醋酸苯汞)、西力生(氯化乙基汞)等汞制劑,其殺菌性很強,可以破坏菌絲中的 類,抑制呼吸作用,殺死靈芝的菌絲或子實体。且此類農藥對人、畜亦有劇毒,故不應用于靈芝的栽培生產。醋苯錫(三苯醋酸錫)、烏米散(三乙基溴化錫苯胺絡合物)等有机錫制劑(高毒農藥)對靈芝菌絲亦具殺傷作用。
常用的一些低毒農藥,如多菌靈、托布津、代森鋅之類,雖然對靈芝菌絲的殺傷力較小,但使用時間過長、劑量過大也會傷害靈芝菌絲。
用于消毒的化學藥物,如75%酒精、甲醛、高錳酸鉀、新洁爾滅、漂白粉、石灰等,對靈芝亦有害,應控制使用時間及劑量。
春雷霉素、天瘟素、放線菌酮(農抗101)、內療素等抗生素類殺菌劑是抗菌譜很廣的藥物,可用做栽培料的殺菌劑,但使用不當也會殺滅靈芝。
聯二苯、龍葵鹼、鎢酸鈉等化學藥物可以引起菌絲的變异,可用于育种實驗。
青霉素、鏈霉素可用于防止細菌性病害,且不影響菌絲生長,但對減數分裂有害,做遺傳學研究時,要慎用。酚 類物質可引起擔孢子發芽管生長异常,危及初級菌絲,也不适用于遺傳育种方面的實驗。
有些化學物質對靈芝的生長是有益的,如α- 二酸、三十烷醇等,對菌絲生長有明顯的促進作用。實驗証明﹕濃度為1×10.6g/ml 三十烷醇溶液可以加速菌絲的生長。但濃度超過2.5×10.6g/ml時,對菌絲的生長起抑制作用。
此外,生長靈芝的各种樹木的浸汁,對靈芝菌絲的生長和分化及子實体的發育皆有一定的促進作用,其原因尚待深入研究。